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Los tests de diagnóstico molecular sirven para detectar secuencias específicas de ADN o de ARN, asociadas a diversos problemas de salud.
Estos tests están basados en la amplificación de ácidos nucleicos mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), así como en la posterior hibridación de dichos fragmentos con sondas específicas para aquella diana que se quiera detectar. Esta hibridación puede llevarse a cabo utilizando diferentes técnicas.
En la técnica del blot reverso, la hibridación se produce con sondas inmovilizadas sobre una membrana, una vez finalizada la PCR. De esta manera, se pueden detectar hasta 24 dianas en un mismo test, facilitando el diagnóstico en caso de coinfecciones o cuando hay diferentes marcadores para una misma condición genética. Esta técnica es la que utilizan los productos de la línea Opegen.
En la técnica de PCR real time, en cambio, la hibridación se produce con sondas marcadas con fluoróforos durante el proceso de PCR. Así pueden detectar hasta 4 dianas en un mismo test, de manera rápida y sencilla. Esta técnica es la que utilizan los productos de la línea de PCR rt.
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En los tests de hibridación en tira, se necesita un termociclador convencional y un termoagitador. En el caso de los tests de PCR real time, se necesita un termociclador real time. En las instrucciones de cada producto se indican los aparatos que se han validado, pero se podrían usar otros si el usuario valida su uso.
No, los reactivos de extracción no están incluidos en el kit. Algunos de nuestros kits permiten realizar un breve proceso de lisis que sustituye el proceso de extracción de ácidos nucleicos, facilitando y reduciendo los costes del procedimiento. Estos reactivos de lisis sí están incluidos es esos kits.
Todos nuestros kits tienen todos los componentes que se necesitan ya preparados para ser usados, evitando manipulaciones y facilitando el proceso.
Todos los productos de hibridación en tira tienen el mismo protocolo de hibridación, y los protocolos de PCR son muy similares. En los productos de PCR real time, todos los que pertenecen a una misma línea tienen el mismo protocolo de PCR.
La PCR o reacción en cadena de la polimerasa es un proceso que permite la amplificación de forma específica de zonas concretas de ADN y ARN de manera que, partiendo de cantidades muy pequeñas de material, se llega a obtener un gran número de copias de la zona deseada. Se utiliza para numerosas aplicaciones, entre ellas la detección de material biológico de diferentes organismos, la detección de mutaciones que conduzcan a la aparición de enfermedades genéticas, el análisis de polimorfismos (estudios poblacionales, estudios de paternidad), etc. El modo de procesar el producto de una PCR depende de qué es lo que se vaya a analizar. Si sólo se quiere ver si se ha producido amplificación lo más habitual es la realización de una electroforesis en gel. Si se quiere detectar una secuencia específica existen múltiples opciones: análisis de restricción (digestión con enzimas de restricción y visualización de los productos obtenidos), blot (hibridación en membranas de nylon con sondas específicas), ELISA, secuenciación, etc.
