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Test para la detección y genotipado de VPH de alto y bajo riesgo

Los productos High PapillomaStrip y High+Low PapillomaStrip son dos tests basados en la técnica del blot reverso, los cuales permiten la detección cualitativa y genotipado de 19 y 37 subtipos (respectivamente) del Virus del Papiloma Humano (Papillomavirus o VPH) en muestras de ADN procedentes de frotis o biopsias cervicouterinas, frotis de pene y orina.

El virus del papiloma humano es la enfermedad de transmisión sexual (ETS) más común a nivel mundial. De todos los genotipos de VPH existentes, más de 40 pueden infectar el tracto ano-genital y un tercio de estos están directamente relacionados con el cáncer cervical y las neoplasias anales. De hecho, más del 90% de estos cánceres son causados por infecciones de VPH no tratadas, convirtiéndose en el cuarto cáncer más común detectado en mujeres a nivel global.

La OMS establece tres métodos para el cribado de lesiones precancerosas, entre los que se encuentran los tests para la detección de VPH de alto riesgo. Este método es el más específico de los tres, y puede detectar la presencia del virus antes de que haya causado lesiones, ayudando a realizar un diagnóstico más temprano y preciso de la enfermedad.

El test High PapillomaStrip permite la detección cualitativa e individual de hasta 19 de los genotipos de VPH de medio-alto riesgo más comunes en muestras de ADN procedentes de frotis o biopsias cervicouterinas, frotis de pene y orina.

El test High+Low PapillomaStrip permite la detección cualitativa e individual, en un solo test, de 37 genotipos de VPH (18 de bajo riesgo y 19 de alto-medio riesgo) en muestras de ADN procedentes de frotis o biopsias cervicouterinas, frotis de pene y orina.

proteger 1

Fiable

deteccion de coinfecciones

Detección de co-infecciones

search 1

37 subtipos en 1 solo test

zoom in 1

Amplificación de regiones E6/E7

adn 1

Uso de sondas y primers específicos para cada genotipo

Nuestros productos para la detección y genotipado de VPH de alto y bajo riesgo

Producto
Técnica
Muestra
Ficha
Decl. CE
Instrucc.
No. referencia
High+Low PapillomaStrip
Hibridación en tira
ADN extraído de frotis o biopsias cervicouterinas, frotis de pene u orina
3.148.016.53.000
3.148.048.53.000
High PapillomaStrip
3.146.016.53.000

Detección de 19 o 37 subtipos de VPH en una sola prueba, lo que permite obtener información más completa para el diagnóstico, así como hacer un seguimiento de la infección (pudiendo comprobar si los subtipos desaparecen o no tras el tratamiento) y tras la aplicación de la vacuna contra el VPH.

Detección individual de los subtipos. La detección no agrupada de los subtipos permite la identificación de posibles co-infecciones, ya que proporciona información mucho más detallada acerca de la presencia de los mismos.

Uso de primers y sondas específicos para cada subtipo. Esto permite aumentar la especificidad de la prueba y eliminar reacciones cruzadas. De esa forma, el resultado obtenido es más fiable.

Amplificación de las regiones E6/E7 en lugar de la L1. Las estrategias de PCR del VPH dirigidas a la región E6/E7 pueden ser preferibles a la L1 debido a las siguientes razones:

  • E6 y E7 son las regiones oncogénicas del VPH.
  • E6 y E7 presentan una fuerte conservación de la secuencia incluso después de la infección, mientras que E2 y L1 pueden eliminarse.
  • La secuencia E6/E7 difiere entre los tipos de VPH de alto y bajo riesgo, proporcionando así una discriminación diagnóstica utilizando la PCR para las pruebas.
  • E6 y E7 son regiones conservadas y estables, lo que garantiza su detección.

Publicaciones

N.º
Título
Link
Idioma
C1
Comparison of five automated CE/IVD labeled HPV DNA genotyping test systems
Inglés
C2
Prevalence and genetic distribution of human Papyloma virus in women with cervical intraepithelial neoplasia
Inglés
C3
Incidence of Chlamydia trachomatis infection in high risk human papillomavirus infected young women
Inglés
C4
Preliminary evaluation of the High+Low PapillomaStrip Assay Colli-PeeTM collected UCM preserved urine
Inglés
A1
Human papillonavirus infection in oral fluids of HIV-1-positive men: prevalence and risk factors
Inglés
A3
Test Kitu Detekci a Genotypizaci HPV – High a Low Papilloma Strip 8 + 8 strips
Polaco
A4
Identificación, Incidencia y Distribución de Genotipos del Virus del Papilloma Humano en una muestra de la población costarricense
Español
A5
Human papilloma virus genotyping in women with abnormal cytology (Ocena genotypów wirusów brodawczaka ludzkiego u kobiet z nieprawidlowa cytologia)
Polaco
A7
In situ FoxP3+ and IL-10 over expression is associated with high grade anal lessions in HIV infected patients
Inglés
A8
Human Papillomavirus Genotyping among Different Cervical Smears in Duhok/Irak
Inglés
A9
Colli-Pee – Performance of a game-changing sampling device for HPV-based cervical cancer screening
Inglés

Seminarios

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En este seminario, la doctora Paula Cortiñas, reputada ginecóloga, habla sobre cómo prevenir el cáncer cervical, así como sobre su relación directa con las infecciones por VPH.

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    Preguntas frecuentes

    Los VPHs anogenitales se dividen, generalmente, en dos categorías: de riesgo oncogénico potencial bajo, o de riesgo medio-alto. Los VPHs de alto riesgo suelen estar asociados a lesiones precancerosas de alto grado y a cáncer invasivo (los tipos 16 y 18 son los causantes del 70% de este tipo de lesiones), mientras que los VPHs de bajo riesgo se suelen encontrar en condiciones asintomáticas o benignas, como por ejemplo las verrugas genitales. Estas diferencias en el potencial oncogénico de los HPVs hacen que sea necesario identificar el tipo de HPV presente en la muestra, lo que permitirá aplicar un tratamiento mucho más específico y en una fase más temprana de la enfermedad.

    Al tomar el hisopo, se recomienda almacenarlo sin ningún medio de transporte. Si se añade PBS (porque se realizan otros exámenes que lo requieren), la muestra debe almacenarse congelada hasta la extracción. De lo contrario, podrían crecer otros microorganismos, aumentando la cantidad de ADN y degradando la muestra. Antes de la extracción, se resuspende el hisopo seco en 500 µl de PBS en un tubo de 1,5 ml, mezclando con vórtex durante 1 minuto. A continuación, se centrifuga el tubo durante 2 minutos, a 18.000 g. Tras desechar el sobrenadante, se añaden 500 µl de PBS, y se resuspende el pellet mediante vórtex. Centrifugar el tubo durante 2 minutos, a 18.000 g. Descartar el sobrenadante. Resuspender el pellet con 200 µl de PBS, y proceder como se indica en el protocolo (20 µl de proteinasa K + 20 µl de tampón AL, etc.). De este modo, se eliminará el material interferente y la PCR será más “limpia”.

    Generalmente no se puede calcular una S y E diagnósticas, sino una concordancia de S y de E entre 2 técnicas, al no ser realmente ninguna el Gold Standard. Es decir, que solo se puede decir cómo se compara una con la otra. Por otro lado, las técnicas comparadas no detectan los mismos tipos exactamente. Eso quiere decir que, si está presente uno de los tipos no detectado por una de las técnicas, habrá una discordancia. No por un falso resultado, sino porque el test no está preparado para detectarlo.

    Para la toma de muestra, se recomienda utilizar una torunda de algodón o cepillo seco y estéril. Hay que asegurarse de tomar una cantidad suficiente de muestra, pero sin que se produzca el sangrado de la lesión. Posteriormente se guardará la torunda en su tubo, sin utilizar ningún medio conservante. Mantenerla a 2/8 ºC si se va a procesar en menos de una semana, o a -20ºC si se va a procesar más adelante.

    No, no es necesaria la presencia de lesiones. El diagnóstico se puede realizar antes de la aparición de las lesiones.

    Los kits de auto-toma no se han validado. Por lo tanto, en principio, es aconsejable que la toma sea realizada por un profesional sanitario.

    Una posible explicación es que la paciente se infecte y recupere entre los análisis. Si la infección es leve y el sistema inmune está fuerte, la paciente puede superar la infección y que, para el siguiente análisis, se haya contagiado de nuevo con otros tipos. Existe también la posibilidad de que la paciente tenga co-infecciones con varios tipos de VPH, pero que todos ellos posean una carga vírica muy baja. En estos casos, es posible que no lleguen a amplificarse todos los tipos en cada ensayo, sino que se amplifiquen de forma aleatoria. Dado que no se repiten los tipos no parece probable, pero no se puede descartar. Otra razón podría ser que hubiese habido contaminaciones en los diferentes ensayos. Es poco probable que se haya dado en varios ensayos de forma diferente, pero siempre hay que comprobarlo poniendo blancos en todos los ensayos para asegurar la veracidad de los resultados.

    Posiblemente se trate de una contaminación. Se deberán analizar blancos: si son correctos, entonces el resultado es válido. No debe extrañar porque la infección múltiple en estos casos es frecuente. En cambio, si el análisis de blancos sale contaminando, entonces existe contaminación. En ese caso se debe desechar los reactivos y realizar el protocolo de limpieza. No se deben analizar más muestras hasta que se obtengan varios blancos válidos. Para más información, ver tabla XXX.